植物遗传转化服务

植物遗传转化是应用重组 DNA 技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术，有目的地将外源基因或 DNA 片段插入受体植物基因组并通过减数分裂获得新植株的技术，已广泛应用于现代农业研究以选育性状优良品种。我们采用农杆菌介导的叶盘/愈伤转化法，流程包括目的基因克隆、植物表达载体构建、农杆菌转化与侵染、选择培养、生根培养和阳性鉴定，可获得稳定转化的再生植株。

拟南芥是植物分子生物学研究中使用最广泛的模式植物。我们采用农杆菌介导的遗传转化方法，可获得稳定的转基因株系，适用于基因功能验证、启动子活性分析及蛋白定位等研究。

烟草是植物基因表达与蛋白瞬时/稳定表达研究的经典材料。农杆菌介导的叶盘转化法成熟高效，可快速获得阳性转基因植株，也适用于亚细胞定位与蛋白互作验证等实验。

水稻是重要的单子叶粮食作物与功能基因组研究模式。采用农杆菌介导的愈伤组织转化法，可获得能够稳定遗传的转基因或基因编辑水稻植株，服务分子育种与基因功能研究。

油菜是我国重要的油料作物。通过农杆菌介导的下胚轴或子叶转化，可获得转基因油菜植株，适用于油脂合成、抗逆、抗病等性状改良及基因功能研究。

甘蓝是十字花科重要蔬菜作物。采用农杆菌介导的子叶或下胚轴遗传转化，可获得转基因甘蓝植株，适用于抗病、抗逆、品质改良及基因功能研究。

莴笋是我国广泛种植的重要蔬菜。可承接二青、三青等常见莴笋品种的遗传转化，采用农杆菌介导法获得转基因植株，用于品质、抗逆等农艺性状改良研究。

番茄是研究果实发育、成熟及抗病的重要模式作物，也是全球主要蔬菜作物之一。采用农杆菌介导的子叶/下胚轴遗传转化，可获得稳定转基因番茄植株。

马铃薯是全球重要的薯类粮食作物，常通过无性繁殖保持性状。采用农杆菌介导的茎段/叶盘遗传转化，结合组织培养获得转基因马铃薯植株，适用于淀粉代谢、抗病等研究。

杨树是林木遗传改良与木本植物基因功能研究的重要模式树种。采用农杆菌介导的叶片/茎段遗传转化，结合不定芽诱导获得转基因杨树植株，可用于木材形成、抗逆等研究。

采用基于同源重组的基因克隆方法进行植物表达载体构建，相比传统酶切连接更适于长片段或多片段的灵活组装。服务涵盖过表达、RNAi、VIGS 等植物基因表达载体，基因片段一般通过 PCR 从模板中扩增，保留原物种序列真实状态。

提供适用于植物的 CRISPR/Cas9 基因编辑载体构建服务，包括单靶点或多靶点 gRNA 设计、载体组装与测序验证，用于后续植物遗传转化获得编辑突变体。

为方便客户，在完成转基因服务后可进一步提供突变体筛选服务。根据目标基因 sgRNA 的位置设计特异性鉴定引物和突变检测引物，对生根植株进行基因组提取、PCR 转基因鉴定和一代测序，并对测序结果进行分析，确定突变类型。

为做群体鉴定的客户提供种苗和初步筛选。将转基因种子播种到含对应抗性的培养基中萌发，移栽后进行转基因鉴定（混合样），并按需求混合收取种子。超表达服务额外提供目的基因表达倍数分析。

在完成转基因后提供组培苗继代服务。根据目标基因位置设计特异性 PCR 转基因鉴定引物，对生根苗进行阳性鉴定，将阳性苗从组培平板转移到组培瓶中进行扩大培养。

在完成转基因后提供组培苗寄养服务。将组培生根苗从平板移栽到营养土中，进行 PCR 转基因阳性鉴定；超表达项目进一步筛选 3 株高表达效率植株单收种子，基因编辑项目从 6 株阳性植株单收种子。

依托成熟的植物遗传转化平台与为全国 100 多家单位提供服务的项目经验，承接珍稀中药材、果树及花卉的扩繁、愈伤诱导服务，以及植物基因功能验证、基因编辑、分子育种等专项技术开发与合同合作。